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細胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒的銷(xiāo)售產(chǎn)品:腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體MCM2/FITC 熒光素標記微小染色體維持缺陷蛋白2抗體IgG誘導分化相關(guān)蛋白1抗體MCM3/FITC 熒光素標記微小染色體維持缺陷蛋白3抗體IgG細胞內流鉀通道Kir4.1抗體Hanks鈣鎂平衡鹽緩沖溶液(HBSS)不含NaHCO3107-43-7標準品谷胺氨溶液(100X)60-80-010倍Hanks平衡鹽緩
產(chǎn)品分類(lèi)
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商品介紹:
本試劑盒是針對細胞凋亡過(guò)程中產(chǎn)生的核小體間DNA鏈斷裂而設計的??梢苑浅S行У爻樘嵝∑螢?80-200bp的DNA ladder,同時(shí)又可以抽提到50kb以上的基因組DNA。DNA ladder也稱(chēng)DNA fragmentation,是細胞凋亡的一個(gè)重要指標。通常觀(guān)察到DNA ladder,就可以判定細胞發(fā)生了凋亡。本試劑盒足夠抽提50個(gè)細胞或組織樣品。 試劑盒組份: 樣品裂解液———30ml 蛋白酶K————130μl 10M 醋酸銨——6ml TE——————6ml 注意事項:需自備Tris平衡ben酚、氯仿和無(wú)水乙醇。 儲存條件:-20℃,有效期一年。 |
中文名稱(chēng):細胞凋亡DNA斷裂片段提取試劑盒
英文名稱(chēng):DNA fragmentation Extraction Kit
產(chǎn)品規格:50次
產(chǎn)品貨號:LZ-01X6325
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品現貨供應,質(zhì)量有保證、實(shí)驗效果好,我司為您提供免費代測服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規格、用途、實(shí)驗原理等相關(guān)操作說(shuō)明。
實(shí)驗報告:
一、分離與培養:
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;
5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實(shí)驗需要接種于6孔板中繼續培養;
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長(cháng)至80%融合時(shí),棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。
注意事項:
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì )影響使用效果。
4、樣品或試劑被細菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì )導致錯誤的結果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(cháng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復凍融,否則將會(huì )增加空白吸收,從而影響檢測結果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養基或 PBS 來(lái)配制待檢測藥物。如果待測藥物有還原性,則測定不含細胞,僅含有 MTS 的待測藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用新鮮培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測。
9、細胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(cháng)短根據細胞的類(lèi)型和細胞的密度等實(shí)驗情況而定,對于大多數情況孵育 1 小時(shí)即可,白細胞需要培養較長(cháng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測,MTS 溶液的用量相應等比例增加即可。
培養操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養板(每孔一片)或培養皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計數的細胞懸浮液移入培養板中,使蓋玻片*浸在培養液中;
5.將培養板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長(cháng)至覆蓋培養板底部2/3面積時(shí),將培養板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
脂肪合成(FASN)英文名稱(chēng):FASN ELISA KitASTE1蛋白抗體包裝25g
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脂蛋白脂(LPL)英文名稱(chēng):LPL ELISA Kit微絲相關(guān)蛋白1抗體包裝5g
脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PL-A2)英文名稱(chēng):Lp-PL-A2 ELISA Kit腺苷A1A受體抗體包裝5g
脂蛋白相關(guān)磷脂A2(Lp-PLA2)英文名稱(chēng):Lp-PLA2 ELISA Kit芳基硫酯B抗體包裝25g
脂蛋白α(Lp-α)英文名稱(chēng):Lp-α ELISA Kitγ基丁轉抗體包裝5g
正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)英文名稱(chēng):RANTES/CCL5 ELISA Kit共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體包裝1g
整合αM(Itgam/CD11b)英文名稱(chēng):Itgam/CD11b ELISA Kit腫瘤壞死因子α轉換包裝1g
整合α-IIb(Itga2b/CD41)英文名稱(chēng):Itga2b/CD41 ELISA Kit芳香烴受體核轉錄蛋白2抗體包裝250mg
整合α5(Itgax/CD11c)英文名稱(chēng):Itgax/CD11c ELISA KitAlkB同源蛋白8抗體包裝25g
長(cháng)停滯特異性基因產(chǎn)物6(gas-6)英文名稱(chēng):gas-6 ELISA KitABI基因家族成員3結合蛋白抗體包裝5g
粘蛋白/粘液7(MUC7)英文名稱(chēng):MUC7 ELISA KitRho GTP激活蛋白20抗體包裝250mg
粘蛋白/粘液5B(MUC5B)英文名稱(chēng):MUC5B ELISA Kit含錨蛋白重復序列-因子信號抑制物盒蛋白家族10抗體包裝500g
粘蛋白/粘液5AC(MUC5AC)英文名稱(chēng):MUC5AC ELISA Kit乙脫氫1蛋白家族L1抗體包裝25g
粘蛋白/粘液2(MUC2)英文名稱(chēng):MUC2 ELISA Kit軸抑制蛋白2抗體包裝5g
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